故事紧接着上一部继续发展。延科（查宁·塔图姆ChanningTatum饰）和施密特（乔纳·希尔JonahHill饰）好不容易从高中“顺利毕业”，等待着他们的，却是又一轮卧底行动，这一次，他们要挑战的对象是“大学”。和高中相比，大学里人际关系的复杂程度和课业难度都要更上一层楼，这一次，兄弟两人能够顺利完成任务吗？在学园中，延科加入了校足球队，结识了一帮志同道合的好友，与此同时，施密特选择就读艺术系，与古灵精怪的玛雅（安珀·史蒂芬斯AmberStevens饰）发生了一段浪漫轶事。然而，丰富精彩的大学生活令密不可分的延科和施密特之间产生了裂痕，这裂痕之巨大很可能导致患难与共的两人最终分道扬镳。

施密特和詹科在21 Jump Street计划取得成功两年后，再次走上街头调查毒品贩运活动。然而，在追捕以“幽灵”为首的毒贩团伙失败后，哈迪副局长让二人重新参加卧底计划，为迪克森上尉工作——现在迪克森上尉位于街对面的跳跃街 22 号。他们的任务是以大学生身份进行卧底，找到一种名为“WHY-PHY”（努力工作？是的，努力玩耍？是）的合成药物的供应商，该供应商杀死了一名在校园内从经销商处购买该药物的学生。

在大学里，詹科与一对名叫祖克和鲁斯特的运动员成了朋友，他们很快成为调查的主要嫌疑人。詹科开始与那些对施密特不太友好的运动员一起参加聚会。与此同时，施密特假装对满贯诗歌感兴趣，引起了艺术系学生玛雅的注意。一拍即合后，两人发生了性关系，这让玛雅的室友梅赛德斯懊恼不已，施密特后来发现玛雅是迪克森船长的女儿，施密特向迪克森吹嘘“上床”，这让他非常沮丧。尽管睡在一起，玛雅还是告诉施密特不要认真对待这件事，随着詹科与祖克的关系越来越密切，祖克鼓励他加入橄榄球队，他开始感到被忽视。

当施密特和詹科无法识别经销商时，他们去监狱里拜访沃尔特斯先生和埃里克寻求建议（埃里克与沃尔特斯先生处于强迫关系，在施密特射杀他的阴茎后，沃尔特斯先生获得了阴道），沃尔特斯指出照片中经销商手臂上有一个独特的纹身。当与 Zook 和 Rooster 闲逛时，Jenko 注意到 Rooster 没有纹身，但在 Zook 的手臂上看到了它。施密特和詹科受邀加入兄弟会但施密特拒绝了，詹科通过了他们的要求，这进一步加剧了两人之间的紧张关系。他们后来意识到 Zook 不是经销商，而是另一个客户。不久之后，他们在校园里找到了幽灵和他的手下，但幽灵再次躲避了他们。詹科向施密特透露，他已经获得了祖克的足球奖学金，并且不确定自己作为一名警察的未来。随后，施密特透露了自己的真实身份并搬出宿舍，激怒了玛雅。

春假施密特到达，并追赶幽灵。詹科也加入了他，因此两人可以一起执行最后一项任务。两人前往海滩，The Ghost 很可能在那里处理 WHY-PHY。在一家酒吧里，他们发现幽灵的女儿梅塞德斯正在向其他经销商发出指示。两人在迪克森和跳跃街其他人的支持下伏击了会议。幽灵逃跑了，而梅赛德斯则被施密特击倒。在追击幽灵时，詹科肩膀中弹。幽灵试图乘坐直升机逃跑；施密特和詹科设法跳到了直升机上，两人都松开了手，然后詹科向直升机扔了一枚手榴弹。当手榴弹爆炸时，幽灵过早地庆祝了他的胜利。詹科告诉施密特，他仍然想成为一名警察，因为他相信他们的差异有助于他们的伙伴关系，两人在欢呼的人群面前和解。迪克森接近他们，声称自己在一个秘密基地执行新的卧底任务。医学院。

在片尾字幕中，Jenko 和 Schmidt 前往不同的学校执行各种卧底任务，这些任务被描绘成 22 个虚构的续集、一个动画系列、一个视频游戏和一个玩具系列。其中一项任务是布克警探的任务，而另一项任务则是在直升机爆炸中幸存下来的幽灵的回归。片尾彩蛋场景显示埃里克和沃尔特斯先生一起躺在床上，沃尔特斯先生暗示他怀了埃里克的孩子。